Analiza PCR: ce este? Cum să luați corect testul PCR

Nu cu mult timp în urmă,o metodă extrem de sensibilă și rapidă de diagnosticare a diferitelor boli infecțioase ale unei persoane. Această metodă se numește "analiză PCR". Ce este, ce va fi esența ei, ce microorganisme poate dezvălui și cum să o înmânați în mod corespunzător, vom spune în articolul nostru.

Istoria descoperirii

S-a inventat metoda reacției în lanț a polimerazei (PCR)Cercetătorul american Cary Myullis în 1983. Inițial a brevetat metoda de diagnosticare de către compania "Cetus Corporation", în care a lucrat creatorul său. Dar, în 1992, toate drepturile și brevetele au fost vândute companiei "Hoffman-La Roche". Apoi, se pare că au fost efectuate studii paralele similare și au fost înregistrate de alți biologi americani, cum ar fi Alice Chen, David Edgar și John Treel. În 1980, oamenii de știință sovietici A. Slyusarenko, A. Kaledin și S. Gorodetsky au abordat această problemă. Prin urmare, era imposibil să se determine singurul deținător de drepturi. Mulți biochimisti remarcabili au contribuit la dezvoltarea metodei de reacție în lanț a polimerazei și au brevetat inovațiile. În prezent, analiza PCR este efectuată peste tot în laboratoare special echipate.

Esența metodei de diagnosticare PCR

Analiza PCR: ce este și cum funcționează? Esența metodei este de a crește într-un mediu microbian specific prin intermediul unei enzime speciale de ADN polimerază în condiții artificiale. Pentru a face acest lucru, multiplicați materialul ADN existent. Astfel, în prezența unui microorganism patogen în probă, cantitatea sa va fi mărită prin manipulări biochimice de laborator și bacteria nu poate fi detectată într-un microscop.

Analiza PCR - ce este?

Cum se desfășoară cercetarea materială?

Analiza necesită:

  • Șablonul DNA;
  • primeri care leagă capetele unui fragment de material;
  • o enzimă ADN polimerază stabilă termic;
  • substanțe chimice care asigură buna funcționare a enzimelor;
  • o soluție tampon necesară pentru a crea condiții adecvate pentru creșterea și dezvoltarea materialului ADN.

    Analiza PCR 12

Pentru a efectua PCR, se efectuează 25-30 repetări, constând din trei etape: denaturarea, recoacerea și alungirea.

Pentru analiza reacției în lanț a polimerazeiutilizați un dispozitiv special - un amplificator. Echipamentul modern vă permite să setați programul necesar pentru încălzirea și răcirea tuburilor pentru a elimina erorile în timpul diagnosticării.

Unde se utilizează diagnosticul?

Metoda de reacție în lanț a polimerazei este utilizată în diferite domenii ale medicinei:

  • Oamenii de știință de la forensic o utilizează pentru a identifica materialul genetic, cum ar fi părul, saliva sau sângele;
  • Analiza sângelui PCR ajută la genotiparea, de exemplu, pentru a detecta o reacție individuală modificată genetic la un medicament specific;
  • cu ajutorul unei astfel de metode, să stabilească existența legăturilor familiale între oameni;
  • metoda cea mai populară PCR a devenit în diagnosticarea medicală pentru definirea diferitelor boli infecțioase.

Ce infecții dezvăluie PCR?

Deci, medicina a folosit mult timp și cu succes analiza PCR. Ce este, am învățat deja. Și ce agenți patogeni pot fi detectați? Următoarele boli infecțioase sunt diagnosticate prin PCR:

  • hepatită A, B, C;
  • ureaplasmosis;
  • candidoza;
  • chlamydia;
  • micoplasmoze;
  • Vaginoza bacteriană;
  • infecție cu mononucleoză;
  • trichomoniaza;
  • infecție cu papilomavirus;
  • tuberculoza;
  • infecția cu herpes de tip 1 și 2;
  • Helicobacter pylori;
  • citomegalovirus;
  • difterică;
  • salmoneloza;
  • Infecția cu HIV.

    Analiza PCR pentru HIV

De asemenea, metodele PCR sunt utilizate în diagnosticul cancerului.

Avantajele metodei

Diagnosticul PCR are mai multe avantaje:

  1. Sensibilitate ridicată. Chiar și numai cu câteva molecule de ADN ale microorganismului, analiza PCR determină prezența infecției. Metoda va ajuta la bolile cronice și latente. Adesea, în astfel de cazuri, microorganismul este necultivat în alte moduri.
  2. Pentru studiu, este adecvat orice material, cum ar fi saliva, sânge, sex, păr, celule epiteliale. Cel mai frecvent este un test de sânge și un frotiu urogenital pe PCR.

    PCR: efectuați testul

  3. Nu necesită cultivarea culturilor pe termen lung. Procesul de diagnosticare automată vă permite să obțineți rezultatele studiului după 4-5 ore.
  4. Metoda este aproape 100% fiabilă. Au fost înregistrate doar cazuri singulare cu un rezultat fals negativ.
  5. Abilitatea de a identifica mai multe tipuriagenți patogeni dintr-o singură probă de material. Acest lucru nu numai că accelerează procesul de diagnosticare a bolii, dar, de asemenea, reduce semnificativ costurile materiale. Adesea, medicul prescrie o analiză PCR completă. Prețul examenului, care constă în definirea a șase agenți patogeni, este de aproximativ 1500 de ruble.

Recomandări pentru pregătirea analizei

Pentru ca rezultatele să fie fiabile în studiul PCR, analiza trebuie făcută pe baza recomandărilor pentru pregătirea preliminară pentru diagnosticare:

  1. Înainte de a renunța la saliva, trebuie să vă abțineți de la a lua alimente și medicamente cu 4 ore înainte de a lua materialul. Imediat înainte de procedură, clătiți-vă gura cu apă fiartă.
  2. Normele de mai sus trebuie urmate atunci când se ia o mostră de pe suprafața interioară a obrazului. După clătire, se recomandă efectuarea unui masaj ușor al pielii pentru izolarea secreției glandei.
  3. Urina este de obicei recoltată la domiciliu. Pentru a face acest lucru, trebuie să faceți o toaletă completă a organelor genitale. Este necesar să se colecteze 50-60 ml de urină într-un recipient steril de plastic. Pentru a asigura puritatea materialului, se recomandă ca femeile să introducă un tampon în vagin, iar bărbații să tragă maxim pliul de piele. Nu puteți lua materialul în timpul fluxului menstrual.
  4. Pentru sperma, trebuie să te abții de la sexAcționați timp de 3 zile înainte de colectare. De asemenea, medicii sfătuiesc să refuze să viziteze sauna și să ia o baie fierbinte, consumând alcool și mâncare picantă. Cu 3 ore înainte de test, trebuie să vă abțineți de la urinare.
  5. Pentru administrarea frotiului urogenital, de exemplu dacăo analiză a Chlamydia PCR, la femei și bărbați se recomandă odihnă sexuală timp de 3 zile. Cu 2 săptămâni înainte de test, medicamentele antibacteriene nu ar trebui luate. Pentru o săptămână trebuie să întrerupeți utilizarea de geluri intime, unguente, supozitoare vaginale, seringi. Cu 3 ore înainte de test, trebuie să vă abțineți de la urinare. În timpul menstruației, colectarea de material nu se efectuează, numai după 3 zile după încetarea eliminării sângelui poate lua un frotiu urogenital.

PCR în timpul sarcinii

În perioada de așteptare a copilului multe infecțioaseBolile cu transmitere sexuală sunt extrem de periculoase pentru dezvoltarea normală a fătului. DTS pot provoca retardare a creșterii intrauterine, avort spontan sau naștere prematură, malformații congenitale ale copilului. Prin urmare, este extrem de important să treceți un test PCR rapid. Este necesară prezentarea analizei la înregistrare - până la 12 săptămâni.

Analiza Chlamydia PCR

Materialul de gard provine din canalul cervicalcu ajutorul unei perii speciale. Procedura este nedureroasă și nu reprezintă un pericol pentru copil. De obicei, în timpul sarcinii, chlamydia este analizată prin metoda PCR, precum și ureaplasmoză, micoplasmoză, citomegalovirus, herpes și papilomavirus. Un astfel de complex de examinări se numește PCR-6.

PCR pentru diagnosticul HIV

În legătură cu faptul că metoda de reacție în lanț a polimerazeireacția este foarte sensibilă la schimbările în organism și la condițiile diagnosticului, mulți factori pot afecta rezultatul. Prin urmare, analiza PCR pentru infecția cu HIV nu este o metodă sigură, eficacitatea acesteia fiind de 96-98%. În restul de 2-4% din cazuri, testul dă rezultate fals pozitive.

Dar în unele situații fără diagnosticare PCR a virusului HIVnu pentru a gestiona. De obicei, aceasta se administrează persoanelor cu un rezultat ELISA fals negativ. Astfel de indicatori indică faptul că persoana nu a dezvoltat încă anticorpi împotriva virusului și nu poate fi detectată fără o creștere multiplă a numărului. Acest lucru poate fi realizat prin efectuarea unui test de sânge utilizând o metodă PCR.

De asemenea, acest diagnostic este necesar pentru copiii din primul an de viață care se nasc dintr-o mamă HIV-pozitivă. Metoda este singura modalitate de determinare fiabilă a statutului copilului.

PCR pentru diagnosticul de hepatită

Metoda de reacție în lanț a polimerazelor permitedetectarea ADN a virusului hepatitei A, B, C cu mult înainte de formarea anticorpilor la infecție sau apariția simptomelor bolii. Este deosebit de eficientă analiza PCR pentru hepatita C, deoarece în 85% dintre cazuri o astfel de boală se administrează asimptomatic și fără a trece în timp util un tratament cronic.

Testul de sânge PCR

Detectarea în timp util a agentului patogen va contribui la evitarea complicațiilor și a tratamentului prelungit.

Studiu complet PCR

Analiza PCR complexă: ce este? Acest test de reacție în lanț care metoda polimezarnoy include determinarea simultană a mai multor specii de infecție: Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis, candidoza, Trichomonas, citomegalovirus, urealitikum ureaplasma, herpes 1 si tip 2, gonoree papillomavirus. Prețul acestor diagnostice variază între 2000 și 3500 de ruble. in functie de clinica, materialele si echipamentele, precum și tipul de analiză: calitativă sau cantitativă. Ceea ce este necesar în cazul dumneavoastră - medicul va decide. În unele cazuri, doar pur și simplu detecta prezența agentului patogen în altele, cum ar fi HIV, rolul important jucat de titru cantitativ. denumite „Analiza PCR a 12“ în diagnosticul tuturor examinării patogenii de mai sus.

Explicarea rezultatelor analizei

Decodificarea analizei PCR nu este dificilă. Există doar 2 scale ale indicatorului - "rezultat pozitiv" și "rezultat negativ". Dacă se detectează un agent patogen, medicii pot confirma prezența bolii cu încredere de 99% și pot continua tratamentul pacientului. În metoda cantitativă de determinare a infecției în coloana corespunzătoare, va fi indicată valoarea numerică a bacteriilor detectate. Numai un medic poate determina gradul de boală și poate prescrie tratamentul necesar.

Unde se trece analiza PCR?

În unele cazuri, de exemplu, în determinareaInfectarea cu HIV prin metoda PCR, cu un rezultat negativ, devine necesar să se efectueze examinări suplimentare pentru confirmarea rezultatelor.

Unde se face analiza?

Unde se prezintă analiza PCR: în statul policlinic sau într-un laborator privat? Din păcate, în instituțiile medicale municipale, echipamentele și metodele sunt adesea depășite. Prin urmare, este mai bine să dați prioritate laboratoarelor private cu echipamente moderne și personal cu înaltă calificare. În plus, într-o clinică privată veți obține rezultate mult mai rapide.

La Moscova, multe laboratoare particulare oferăefectuarea analizei PCR pe diferite infecții. De exemplu, în clinici precum Vita, Complex Clinic, Happy Family și Uro-Pro, se efectuează analiza PCR. Prețul examenului este de 200 de ruble. pentru definirea unui agent patogen.

Se poate concluziona că diagnosticul de infecțiePCR în majoritatea cazurilor este o metodă rapidă și fiabilă de detectare a agentului patogen în organism în stadiile incipiente ale infecției. Dar, în anumite cazuri, merită ales alte metode de diagnosticare. Necesitatea de a efectua un astfel de studiu poate fi determinată numai de un specialist. Decodificarea analizei PCR necesită, de asemenea, o abordare profesională. Urmați recomandările medicului și nu vă predați teste, care nu sunt necesare.

a placut:
0
Analiza urinei de către Nechiporenko. Cum se asamblează
Analiza generală a urinei. Cum să luați și ce este norma?
Cum se testează sângele ocult fecal?
Unde să luați bifa pentru analiză? Ce să faci când
Cât de corect trebuie să predați analiza fecalelor și dacă este necesar
Cum să dăruie corect sânge hormonilor?
Poate fi luat un test de sânge pentru HIV
Cum să trimiți corect testul de urină?
Ce vor spune analizele urinare (decodare)
Top Posts
în sus